· 切割位置为 1 起始编号，表示在该编号碱基之后切开。绿色行 = 唯一位点（克隆设计优先选择）。 · 末端类型：5' 突出（如 EcoRI +4）、3' 突出（如 PstI -4）、平末端（如 SmaI）。 · 酶库为常用酶精选（48 种），未含全部酶；实际酶切请查阅厂家目录确认 buffer 与 star 活性。